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    豬副粘病毒PCR檢測試劑盒廠家

    產品簡介

    豬副粘病毒PCR檢測試劑盒廠家
    上海聯祖生物相關產品:
    HRGP檢測試劑盒要使用溶血或高血脂血將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000&amp;#215;g離心10分鐘,取上清液

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:534
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    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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     產品名稱

     豬副粘病毒PCR檢測試劑盒廠家

     英文名稱

     Porcine paramyxovirusRTPCR

     貨號

     LZP7166

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    Gold(III) chloride維多利亞藍B Biological stain異佛手柑內酯 分析標準品,≥98%

    Iron(III)chloride hexahydrate鋅試劑 ≥85%(HPLC)異古倫賓 分析標準品,≥98%

    Iron(III) chloride二乙基二硫代氨酸鋅 98%異葒草素 分析標準品,≥98%

    Nickel chloride hexahydrate氯鉑酸 六合物 AR,Pt ≥37.5%異麥角甾苷 分析標準品,≥98%

    Stannic chloride dihydrate氯金酸 48~50% Au basis異鼠李素-3-O-新橙皮糖苷 分析標準品,≥98%

    Tin(II) chloride anhydrous氯銥酸 Ir 35% in HCl異飛薊賓 分析標準品,≥98%

    Stannic chloride pentahydrate三氯化銥  試劑級,Ir>52%酸棗仁皂苷 A 分析標準品,≥98%

    Zinc chloride氯化鈀  Pd 59-60%酸棗仁皂苷 B  分析標準品,≥98%

    Bismuth Chloride硝酸鈀(II) 合物 Pd ≥39.0%鹽酸藥根堿 分析標準品,≥98%

    Chromic chloride hexahydrate鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μm醉椒素 分析標準品,≥99%

    Chromium(III) chloride anhydrous氯亞鈀酸 Pd ≥32.6% 石松靈堿 分析標準品,≥98%

    Indium chloride硝酸銠溶液 10 % 溶液蓮心堿 分析標準品,≥98%

    Iron(II) chloride tetrahydrate硝酸銠溶液 5 % 溶液羽扇豆 分析標準品,≥98%

    Lead chloride三氯化釕 合物 38.0-42.0% Ru basis石蒜裂堿 分析標準品,≥98%

    Manganese chloride二氯四氨鈀 Pd ≥43.0%羥基積雪草苷 分析標準品,98%

    Silver chloride4-乙酰嗎啉 98%羥基積雪草苷 98%

    2-甲氧基雌二(進分)Atg5 (D5F5U) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG/Cy3  Cy3標記的兔抗人IgG

    2-甲氧基雌二Atg5 (D5F5U) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG/Bio  生物素標記的兔抗人IgG

    2-甲氧雌二(標準品)VatalanibRabbit Anti-human IgG/APC  APC標記的兔抗人IgG

    鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明RKIP (D42F3) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG/AP  堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗人IgG

    鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明(標準品)Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgG

    頭孢哌酮鈉Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG

    頭孢哌酮鈉(標準品)FAK (D2R2E) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgG

    N-芐基甘氨酸PathScan® Total HER4/ErbB4 Sandwich ELISA KitRabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG

    扎那米韋Spry1 (D9V6P) Rabbit mAbRabbit anti-human IgG whole serum  兔抗人IgG抗血清

    扎那米韋(標準品)IRF-7 (D2A1J) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2/RBITC  羅丹明標記的兔抗人IgG F(ab')2
    豬副粘病毒PCR檢測試劑盒廠家人痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

    人通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃1克

    人通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500毫升

    人通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

    人通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

    人通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50克

    人通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10克

    人閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

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