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    羅西奧病毒PCR檢測試劑盒說明書

    產品簡介

    羅西奧病毒PCR檢測試劑盒說明書
    上海聯祖生物相關產品:
    TTV檢測試劑盒提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:551
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    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     羅西奧病毒PCR檢測試劑盒說明書

     英文名稱

     Rocio VirusRTPCR

     貨號

     LZP7239

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    Glycyrrhizic acid ammonium salt庫侖法酮測定陽極用卡爾費休試 也可用作無隔膜電解液3-(4-)戊二酸 98%

    Rhein庫侖法安全型陽極用卡爾費休試劑 不含甲、氯(4-溴苯基)乙炔 97%

    Olealic acid庫侖法安全型陰極用卡爾費休試劑 不含甲、氯和四氯化碳4-溴-2-氟苯甲 98%

    Cesium hydroxide mohydrate庫侖法酮測定陰極用卡爾費休試 用作有隔膜陰極電解液4-溴乙基苯 99%

    Acetylene tetrabromide單組份無吡啶卡爾費休滴定劑 5mg/ml,測量較高樣品1-溴-3-苯 98%

    p-Benzoquine單組份無吡啶卡爾費休滴定劑 2mg/ml,測含量較低樣品1-溴-4-苯 98%

    N-Nitrosodiethylamine異胺 >99.0%(GC)4-溴-2-氟苯 99%

    Hecogenin異胺 >93.0%(GC)1-溴-2-氟-4-苯 97%

    1-Dodecanethiol異胺 CP,98.0%4-溴-3-氟苯甲 97%

    Poly(acrylic acid)二異胺 98%4-溴-3,5-二氟苯甲 98%

    1,3-Dihydroxynaphthalene三異胺 95%1-溴-4-n-丁基苯 97%

    HFIP(±)-樟腦(合成) 96%1-溴-4-己苯 97%

    Iodine trichlorideAR,99.5%4-正丁基聯苯 97%

    ChloroiodideCP,99.5%4-溴-2-氟苯胺 98%

    1-BromodecaneGR,99.8%鄰溴苯 98%,含穩定劑銅屑

    6-Bromohexaic acidPT,99.8%對氯苯 99%

    聚乙二8000PathScan® Total Ki-67 Sandwich ELISA KitPhospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)  磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體

    氯化鋰(分子生物學級)PhosphoPlus® Tau (Thr181) Antibody DuetPhospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254)  磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體

    硫酸亞鐵銨六PathScan<sup>® </sup>Total B7-H4 Sandwich ELISA Kitphospho-TUBB3(Ser172)  磷酸化神經細胞特異性微管蛋白抗體

    紅四氮唑ARFGAP1 (D9A4V) Rabbit mAbphospho-TSC1(Thr417)  磷酸化結節性硬化癥蛋白1抗體

    磺胺甲氧噠Phospho-HER3/ErbB3 (Tyr1328) (E1J1T) Rabbit mAbphospho-TSC1(Ser505)  磷酸化結節性硬化癥蛋白1抗體

    磺胺甲氧噠(標準品)UBQLN1 (D3T7F) Rabbit mAbPhospho-Troponin I(Ser23/24)  磷酸化鈣調節蛋白-1抗體

    TCEP;三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽Aromatase (D5Q2Y) Rabbit mAbphospho-TrkB (Tyr705)  磷酸化酪氨酸激酶B抗體

    N,N-二甲酰胺(分子生物學級)Phospho-DDR1 (Tyr513) (E1N8F) Rabbit mAbPhospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816)  磷酸化酪氨酸激酶A抗體

    硫代硫酸鈉五(AR)IGF-I Receptor β (D4O6W) Rabbit mAb (IHC Preferred)Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707)  磷酸化酪氨酸激酶A抗體

    化鈉(AR)MBD3 (N87) AntibodyPhospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516)  磷酸化酪氨酸激酶A抗體
    羅西奧病毒PCR檢測試劑盒說明書兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量: 2~8℃25克

    兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10張/包

    兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

    兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

    兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

    兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

    兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

    兔子白介素4(IL-4)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

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