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    斯氏毛滴蟲PCR檢測試劑盒廠家

    產品簡介

    斯氏毛滴蟲PCR檢測試劑盒廠家
    上海聯祖生物相關產品:
    28S rRNP檢測試劑盒 實驗流程
    1.實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
    2.加樣(標準品及樣本)50μL,37℃孵育30分鐘;
    3.洗板5次,加酶標試劑50ul,37℃孵育半小時;
    4.洗板5次;加入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
    5.加終止液50μL,立即450nm讀數。
    6.計算

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:442
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    ?
    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     斯氏毛滴蟲PCR檢測試劑盒廠家

     英文名稱

     Trichomonas stableriPCR

     貨號

     LZP7410

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    CRHD-山梨 用于分子生物學, ≥98%氟甲基-1,1,1,3,3,3-六氟異基 98%

    SAHH木糖 99%N,N`-二苯基硫脲 CP,98%

    Purine-nucleoside phosphorylase雌三 USP*基乙酸 99%

    ADA雌酮 97%異 98%

    GAPDH雌酮 分析標準品肼 99%

    3-Phosphoglyceric Phosphokinase雌二 98%乙酸異烯酯 99%

    Laccase from Rhus vernificera雌二 USP級硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder

    Isocitrate dehydrogenase雌二 分析標準品,99.5%二溴 99%

    γ-MDH潑尼松 98%溴烷 >99.0%(GC)

    Lactoperoxidase from bovine milk1,3-酮二羧酸 97%硫酸鎳銨,六 CP,98.0%

    Pullulanase硫酸阿托品 98.5% 苯甲酰胺 CP

    Aldehyde Dehydrogenase, potassium-activated5-溴苯并[b]噻吩 98%苯甲酰胺 99%

    Glycerokinase苯并噻吩 97%苯甲酰胺 99.5%,升華純化

    D-LDH二苯并噻吩 99%硫酸聯氨 CP,98.0%

    Lipoxidase from soybean二苯并噻吩 98%擰蓋機 SG-1550型手持式

    TIM二苯并噻吩 分析標準品鋼板鍘刀

    十一烷(標準品)Akt1 (2H10) Mouse mAbNPTX2  神經細胞穿透素2抗體

    十一酸(標準品)Akt1 (2H10) Mouse mAbNPTX1  神經細胞正五聚體1抗體

    對二甲苯(標準品)Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135/1136)/Insulin Receptor β (Tyr1150/1151) (19H7) Rabbit mAb (Biotinylated)NPRC/Natriuretic Peptide Receptor C  利鈉肽受體C抗體

    對二甲苯標準溶液(1.00mg/mL,基體:甲)Phospho-mTOR (Ser2448) AntibodyNPRB  利鈉肽受體B抗體

    間二甲苯標準溶液(1mg/ml in Methal,for Water Analysis)Phospho-mTOR (Ser2448) AntibodyNPR2L/G21 protein  G21蛋白質抗體

    鄰二甲苯(標準品)mTOR AntibodyNPHS2/Podocin  腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體

    己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-CD79A (Tyr182) (D1B9) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)NPFF/FMRFamide  痛覺調節肽NPFF抗體

    乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-mTOR (Ser2481) AntibodyNPD014  1號染色體開放閱讀框63抗體

    (standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-mTOR (Ser2481) AntibodyNPC1/Niemann Pick C1  尼曼匹克C1前體蛋白抗體

    茴香(Standard for GC,≥99%(GC))Phospho-mTOR (Ser2481) AntibodyNPAP1  核孔蛋白1抗體
    斯氏毛滴蟲PCR檢測試劑盒廠家3-Chloropyridine,99%通用試劑 5G

    4,6-Dichloropyrimidine,97%通用試劑 5G

    4,6-Dihydroxypyrimidine,98%通用試劑 5G

    2,6-Diamipyridine,98%通用試劑 25G

    2,2'-Dithiodipyridine,≥99.0%通用試劑 1G

    8-Hydroxyquinaldine,98%通用試劑 25G

    1,2-Di(4-pyridyl)ethylene,97%通用試劑 5G

    4-Hydroxypiperidine,98%通用試劑 5G

    4,6-Dimethyl-2-pyrimidinethiol,98%通用試劑 10G

    2-Pyridil N-oxide,≥98.0%通用試劑 25G

    4-Hydroxypyridine,95%通用試劑 25G

    3-Hydroxypyridine,98%通用試劑 25G

    6-Propyl-2-thiouracil,98%通用試劑 25G

    3,5-Lutidine,≥98%通用試劑 25ML

    2,5-Lutidine,95%通用試劑 5ML

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